灵芝多糖测定实验(测定灵芝多糖的实验方法与步骤简介)

灵芝 2023年07月22日

灵芝多糖测定实验

灵芝是一种常用的中国材，历史悠久，被认为具有很多保健作用。其中的主要功能成分是灵芝多糖。因此，测定灵芝多糖含量是判断灵芝品质的重要指标之一。下面简单介绍灵芝多糖测定实验方法与步骤。

实验仪器与试剂

所需仪器：恒温水浴器、离心机、紫外分光光度计等。

所需试剂：酚-硫酸试剂、含氯酸试剂、硫酸、乙醇等。

实验步骤

步骤一：样品制备

取适量灵芝菌体，用清水洗净，切成细小块。将切好的灵芝用乙醇-水混合液浸泡，浸泡时间为2小时。之后，离心分离液体，取出沉淀，再用清水清洗干净。将干燥的灵芝菌体样品粉碎成粉末备用。

步骤二：制备灵芝多糖提取液

将灵芝菌体粉末加入100 mL含氯酸，80°C加热1 h。加入固体硫酸，继续加热1 h。之后，用水稀释待用。

步骤三：测定总多糖含量

将已知质量的灵芝多糖提取液溶液干燥至恒定重量，待冷却后加入酚-硫酸试剂，用紫外分光光度计测量在490 nm处的吸光度。以葡聚糖为标准品计算每克样品的总多糖含量。

灵芝多糖测定实验(测定灵芝多糖的实验方法与步骤简介)-第1张图片-灵芝之家

步骤四：测定多糖分子量

用高速离心法将提取多糖的溶液离心。将得到的沉淀溶于少量水中，通过光度计测定在492 nm处的吸光度并记录。在测量此前，需用高速/低速滤膜过滤分别约1 mL的多糖溶液并测定滤液的吸光度。通过前后两次高速/低速滤膜过滤后滤液的吸光度计算多糖的平均分子量。多糖分子量高低，一定程度上可以反映出灵芝多糖的质量高低。